母细胞的荧光成像均

hasemamla

SULI 蛋白。然后用Amicon Ultra离心过滤装置(Cat#UFC9003，Millipore)用脱盐缓冲液(12mM HEPES、135mM KCl、200mM NaCl和1mM MgCl 2 ，pH7.7)对SUMO-SULI蛋白进行脱盐。 为了测定 SUMO-SULI 蛋白的寡聚状态，使用尺寸排阻色谱柱（Zenix SE-150，Sepax Technology）进行尺寸排阻色谱（SEC）。所有蛋白质样品均以 100 µL 等份注入，浓度范围为 10 µM。用流动相（12 mM HEPES、135 mM KCl、200 mM NaCl 和1 mM MgCl 2，pH7.7）以1 mL/min 的流速平衡柱。冰上蓝

光照射5分钟产生轻态蛋白，然后立即注入HPLC系统。 影像学 除非另有说明，酵使用配备 HC PL APO CS2 ×63.0/1.40 OIL 物镜和 HyD 检测器的 Leica SP8 共焦激光扫描显微镜进行。使用 561 nm 激光和 570–650 nm 发射波长消费者手机号码数据库范围对 mCherry 荧光进行成像。使用 488 nm 激光和 500–550 nm 的发射波长范围对 sfGFP 荧光进行成像。为了检测 NLuc 产生的生物发光，将在光



照或黑暗条件下培养的表达 NLuc-SULI 的工程酵母细胞与 25 μM 呋喃嗪（由 ChemPartner 合成，溶解在 85% 乙醇和 15% 甘油中，浓度为 5 mM 作为储备液）一起孵育解决方案）。使用 Nikon Eclipse Ti2 显微镜对生物发光进行成像。 为了检测 SULI 介导的 Hsp104 介导的蛋白质稳定性动力学，在光照条件下培养工程细胞直至 OD 600达到约 1.0。然后使用新鲜培养基将细胞稀释至1×10 3细胞/μl的密度。将1μl稀释的细胞滴到载玻片表面的固体

Gregorymus

инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инйо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо  
инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо инфо